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胎儿脐带后巩膜加固术的实验研究
马代金 刘双珍
马代金 刘双珍
An experimental study on scleral reinforcement with umbilical cord
Ma Daejin.,Liu. Shu,an,gzhen,. Department of Ophthalmology, Xiangya Hospital of Central-south University , Changsha 410008, China
Abstract Objective To investigate the feasibility and reliability of posterior scleral reinforcement with umbilical cord forpathological myopia. Methods Twenty-four white rabbits were divided into four groups. Scleral reinforcement by means of umbilical cord grafting was performed on the right eye of each rabbit. The tissue specimens of eye were harvested at 2, 4, 12, 24 weeks postoperatively and observed by gross examination and light and electron microscopy. Results At 6 postoperative months, graft healed with host sclera entirely. The “new sclera” appeared to he thicker and harder than before, and no graft rejection and melting were observed. Conclusion The umbilical cord is an ideal biological material for scleral reinforcement.
Key words posterior scleral reinforcement; umbilical cord; pathological myopia
搞要 目的 探讨以胎儿脐带为材料行后巩膜加固术的可行性，为临床提供一种更理想的加固材料。方法 24只家兔分为4组，以胎儿脐带为材料行插片法后巩膜加固术，分别于术后2、4、12、24周取标本，行肉眼观察及光镜、透射电镜检查。 结果 脐带植片与巩膜完全融合，局部巩膜的厚度和硬度明显增加，未见排斥反应和植片吸收现象。 结论 胎儿脐带是一种比较理想的后巩膜加固术材料。
关键词 后巩膜加同术；胎儿脐带；病理性近视
分类号 R 778.1
巩膜加固术是目前对病理性近视眼的病因治疗方法，手术材料主要有自体阔筋膜、异体巩膜、合成材料绦纶等，实践证明它们都有各自的局限性。因此，研究和寻找来源丰富、生物相容性好、不被吸收、生物刺激作用强的加固材料是有待解决的问题。我们以人胎儿脐带为手术材料行后巩膜加固术的动物实验研究，以便用于病理性近视眼的临床治疗。
1 材料与方法
1.1 实验动物
成年健康家兔24只，雌雄不限，体重2～3 kg。随机分为4组，每组6只，以右眼为手术眼。
1.2 材料准备
取足月剖腹产人胎儿脐带，洗净血污，去除脐周组织和脐血管，剪成6 mm x8 mm大小植片，75%酒精浸泡24 h，再置于95%酒精中保存。术前取出植片，生理盐水漂洗，再浸泡于庆大霉素生理盐水中复永30 min备用。
1.3 手术方法
各组同期手术。静脉麻醉，沿鼻上方角膜缘剪开结膜约6 mm，用虹膜恢复器沿巩膜表面向后分离成隧道状，将植片放人隧道内，向后铺平，使平贴于巩膜表面，植片前端缝合1针固定于表层巩膜。
1.4 标本制备
各组分别于术后2、4、12、24周处死家兔，摘出眼球，冲洗干净，切取植片及其附着的巩膜，先肉眼观察，再分别以10%甲醛液固定，石蜡包埋，切片，HE染色，光镜观察；3%戊二醛固定，按常规方法制作电镜标本和切片，透射电镜观察。
2 结果
2.1 肉眼观察
术后轻微的结膜充血、水肿于5d内消失，未见术后感染、植片移位、脱出、溶解吸收、排斥反应等并发症。术后2周，植片表面有少量纤维组织包裹，但植片贴附欠平整，与兔眼巩膜之间有较宽间隙，易移动与分离；术后4周，植片被纤维组织紧密包裹，血管丰富，植片平贴于巩膜，不能推动，但边缘清楚可见；术后12周，植片与巩膜紧密粘连，位置固定，边界模糊，表面有较多新生血管长入；术后24周，植片表面为致密的结缔组织包裹，并长入植片内，不能分离，植片与巩膜完全融合，边缘光滑，四周界限难以分辨，外观表现为局部巩膜增厚，硬度增加。
2.2 光镜及透射电镜观察
术后2周，植片与巩膜之间有较宽间隙，大量炎性细胞浸润，主要为淋巴细胞、少量浆细胞和粒细胞，并可见新生毛细血管长入（图1，2）。术后4周，植片与巩膜的间隙变窄，炎症反应减轻，炎性细胞仍以淋巴细胞为主，其次是多形核白细胞及少量浆细胞和多核巨细胞，并可见成纤维细胞增生，向植片内生长。成纤维细胞异染色质少，功能活跃。术后12周，植片紧贴巩膜，炎性细胞显著减少，仅见少量淋巴细胞、浆细胞、多形核白细胞和多核巨细胞，并向植片内浸润。成纤维细胞增生活跃，大量胶原纤维形成（图3）。但成纤维细胞异染色质较前增多，功能开始减退。术后24周，炎症反应接近完全消退，仅见少数散在分布的炎性细胞。成纤维细胞增生，新生成的胶原纤维充满间隙，将植片与巩膜融合为一，界限模糊不清。仍有新生血管存留，并有血液流通（图4）。
图l 术后2周，植片与宿主巩膜之间有较宽间隙( HE×l00) 图2 术后2周，炎症细胞以淋巴细胞为主，新生血管长人(HE×400) 图#p#分页标题#e#3 术后12周，成纤维细胞增生话跃，大量胶原纤维形成(HE x400) 图4 术后24周，炎症消退，植片与巩膜完全融合( HE x 400)
Fig.1 After 2 weeks, there is 8 gap between the graft and host sclera( HE×l00) Fig.2 After 2 weeks, the gap is full of lymphocytes and newly born blood vessels( HE×400) Fig.3 After 12 weeks, the fibroblast cells proliferate actively and new collagen fibers accumulate( HE x 400) Fig.4 After 24 weeks, the grafts are entirely healed with. sclera( HE×400)
3 讨论
病理性近视眼由于眼轴进行性延长，眼球扩大，脉络膜、视网膜血液循环障碍，最后发生后巩膜葡萄肿、视网膜萎缩、黄斑变性等并发症，导致视功能不可逆性损害，已成为青壮年主要致盲性眼病之一。目前流行的屈光手术如PRK、LASIK等，只能矫正视力，不能阻止近视的发生和发展。后巩膜加固术开展几十年来，虽然其远期疗效不尽人意，有人对此手术提出异议，但是大多数作者认为，这种手术阻止病理性近视眼轴延长、保护视功能的作用是肯定的（1,2）。
既往国内外使用的材料有异体巩膜、硬脑膜、阔筋膜及合成材料绦纶等，它们都有各自的缺点和不足（3）。Curtin认为，加固材料应具有3个基本属性：良好的生物相容性；足够的柔韧性；足够的抗张强度。抗张强度又取决于3个因素：材料的固有强度、与巩膜结合的紧密程度以及材料被宿主吸收的程度。我们的研究发现，去除脐周组织和脐血管后的胎儿脐带组织细胞成分少，未见排斥反应和明显的吸收现象，生物相容性好。胎儿脐带后巩膜加固术后组织病理学变化可分为以下4期：炎症反应期；肉芽组织形成、血管期；胶原纤维形成期；结缔组织增生期。术后2周左右，表现为强烈的炎症反应，随后新生血管长人，肉芽肿形成。成纤维细胞增生在1~3个月时达到高峰，新生成的胶原纤维充满植片与巩膜之间，并向植片内生长。6个月时，炎症消退，植片与巩膜融合为一，但新生血管并未完全闭塞。在植片与巩膜融合部位，巩膜的厚度和硬度明显增加，改变了巩膜的力学特性，可达到机械性加固巩膜的目的。在植片愈合过程中，由于胶原纤维的收缩和牵拉，有可能使受眼巩膜轻微缩短。同时，剩下的新生血管可能增加眼球后部的血液供应，改善脉络膜视网膜的营养妆况。
参考文献
1徐艳春，刘汉强，牛彤彤，等，青少年进展性近视后巩膜加固术远期疗效观察[J]中华眼科杂志，2000，36: 455
2王林农．胎儿脐带捕人巩膜加固术长期疗效观察[J] 眼科研究，2000,18: 275
3龙心光．巩膜加固术治疗高度近视的研究进展[J]．国外医学.眼科学分册，l995，l9：139
